操作錯誤人人都會有,只要不要再犯就好。
HPLC 的操作說難不難,說簡單也不簡單,主要就是要習慣不同軟體的操作。一般藥廠使用的通常為 Waters 的軟體 Empower,Waters 的教育訓練做得很完善,除了可以參加實體課程,網路上也有不少原廠的操作手冊可供參考。
HPLC操作
- 準備移動相 mobile phase
- 過濾 (避免雜質):HPLC 過 0.45um 濾膜;UPLC 過 0.2um濾膜
- 利用超音波震盪除氣 degas
- 放置機台上方並放入濾頭管路
- 打開機台所有開關(通常沒有長假不會關)
- 打開閥門 (非 Waters 機台)- 如果沒開壓力會爆導致停機,如果還有接管柱對管柱很不好
- purge or wet prime-更換管線溶劑與除掉管線中可能的氣泡
- 關閥門並調至正常流速
- 接上管柱
- 打開 detector,待管柱平衡即可進行分析
- 分析結束關 detector
- 以低流速並以適當溶劑清洗管柱
- 置換為包存管柱溶劑
(有些步驟可以利用軟體作設定成固定程序,不用自己手動慢慢調)
(步驟可以依自己的習慣更改)
mobile phase 要 degas,上機後要 purge (有閥門要記得開)
數據處理
基本上就是設定完後 process,詳細請看 Empower 操作手冊或其他品牌手冊。
這邊想跟大家說的是...如果不是 QC 或 ARD 的話(一定會有制式格式),可以問問看部門前輩們有沒有制式的格式,如果沒有建議建立屬於該項目的 excel 檔進行計算,檔案也要自己先做好分類,之後找 data 才不會很悲劇。
LoMei 的第一次操作,大概是在學長的挑剔眼神下戰戰兢兢地進行吧!數據處理就很悲催了,在學校只看圖沒作定量分析也不用計算,進公司就悲劇了,沒人說數據要怎麼處理,於是在坑坑巴巴走過才建立起別人看得懂的表格,後來在QC才發現原來分析後的數據表格可以整理的那麼漂亮。