高效能液相層析法 HPLC
高效能液相層析法（High Performance Liquid Chromatography, HPLC）隨著搭配的移動相、管柱以及偵檢器的不同，可以分析的樣品種類很多元，是個很強的分析儀器。近幾年也開發出更高階的機台「UPLC」，操作與 HPLC 相似(但移動相須過0.2um濾膜)，甚至可以藉由轉換器將 HPLC 的參數直接做調整應用於 UPLC 上可大幅縮短分析時間。
分析原理
移動相
- 等比例沖提 Isocratic elution
- 梯度沖提 Gradient elution
- 增強分離能力、有效減少分離時間
Notice 在線混和 mobile phase有時容易產生氣泡，溶劑須做好gegas
HPLC 太難做整理了，腦袋整個打結，個人很喜歡這家廠商(YMC)的分類方式：http://ymctaiwan.com/columns/#1608790590226-e885cb89-1864
管柱(依分離模式做分類)
- 正向 Normal phase
- 使用低極性溶劑，若要長時間使用機台需更換管路。 - 逆向 Reverse phase
- 離子交換 Ion exchange
- 粒徑篩析/膠體 Size exclusion/Gel (SEC or GPC)
Notice 非常用溶劑要先確認此溶劑濃度對於管線有沒有傷害
USP 針對管柱也有做自己的分類，甚至可以找到藥典上的分析管柱是使用「哪一型 號」的管柱。
偵檢器種類
- 紫外/可見 UV/Vis
- 光電二極體陣列 Diode array detectors, PDA
- 全波長偵檢器，主要用來判斷peak purity - 折射率 Refractive Index, RI
- 無法搭配梯度沖提，機台與管柱平衡時間較長 - 揮發性光散射偵測器 Evaporate light scattering detector, ELSD
- 數據再現性不穩定，在規格方面或許要放寬 - 質譜 Mass spectrometry, MS
- 電化學 Electrochemistry
- 導電度 Conductive
- 螢光 Photoluminescence detector, FLD
LC 「眉角」實在太多了，LoMei 只針對自己用過的然後有特別需要注意的地方做簡述。可能是之前太混，還記得第一次聽到叫我去借 Normal phase 機台時臉上滿臉問號？那是 HPLC 的一種嗎？只有一片空白。
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寫下那些 LoMei 感到疑惑，尋找解答的紀錄。
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